紅細胞膜帶3蛋白水平與中老年人生理狀況相關(guān)分析

常文露  孫永葉 汪求真 杜衛 吳學(xué)謙 馬愛(ài)國¹

青島大學(xué)醫學(xué)院營(yíng)養研究所，青島 266021

摘要：目的 本研究通過(guò)對紅細胞膜帶3蛋白水平與中老年人生理狀況相關(guān)因素關(guān)系的分析，了解帶3蛋白在不同生理狀態(tài)下表達的差異。方法 采取整群隨機抽樣的方法收集中老年人體檢資料及血樣218例，其中男性80例，女性138例。制備紅細胞膜，采用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳技術(shù)分析紅細胞膜帶3蛋白水平。不同分組間帶3蛋白水平的比較采用獨立樣本t檢驗或方差分析，相關(guān)回歸分析采用Pearson 相關(guān)和線(xiàn)性回歸。結果 紅細胞膜帶3蛋白水平與體力活動(dòng)水平（r=0.149）呈正相關(guān)（P＜0.05），與收縮壓（r=-0.156）呈負相關(guān)（P＜0.05）。帶3蛋白水平與性別、年齡、BMI、舒張壓無(wú)相關(guān)關(guān)系（P值均＞0.05）。中等體力活動(dòng)者帶3蛋白含量為24.09%，明顯高于輕體力活動(dòng)者23.42%(P＜0.05)。收縮壓升高者帶3蛋白含量為23.33%，明顯低于正常人水平24.20%(P＜0.05)。結論 帶3蛋白水平的升高伴隨著(zhù)體力活動(dòng)的增加和收縮壓的降低。

關(guān)鍵詞:紅細胞膜 帶3蛋白 中老年人 收縮壓 體力活動(dòng)

中圖分類(lèi)號： 文獻標識碼：A

Correlation of band 3 protein in erythrocytes with physiological status of middle-aged and elderly people

Chang Wenlu , Sun Yongye , Wang Qiuzhen , Du Wei , Wu Xueqian , Ma Aigou

Institute of Nutrition Research；Qingdao University Medical College；Qingdao 266021

ABSTRACT : Objective To analyze the correlation of band 3 protein of erythrocytes with physiological conditions of middle-aged and elderly people, and to investigate the expression of band 3 protein under different physiological status. Methods Cluster randomized sampling method for selecting subjects .Physical examination data and blood samples of 218 middle-aged and elderly people (80 males and 138 females) were collected.  SDS-polyacrylamide gel electrophoresis was used to analyze band 3 protein in erythrocyte membrane.  The difference of band 3 protein in different groups was analyzed by T Test and One-Way ANOVA.  Correlation and regression of band 3 protein with physiological status was analyzed by Pearson correlation and linear regression. Results There was a significantly positive correlation（r=0.149）between the level of band 3 protein and physical activity (P＜0.05), and a negative correlation（r=-0.156）between the level of band 3 protein and systolic blood pressure (P＜0.05). The correlation of band 3 protein with gender, age, BMI and diastolic blood pressure（P＞0.05) is not significant. The band 3 protein level of workers with medium activity was 24.09%, which was significantly higher than that of light activity workers (23.42%) (P＜0.05). The subjects with hypertension were proved to have a significantly lower level of band 3 protein (23.33%) than normal individuals (24.20%) (P＜0.05). Conclusions The level of band 3 protein was positively correlated with physical activity and negatively correlated with systolic blood pressure.

KEY WORDS Erythrocyte membrane；Band 3 protein；Middle-aged and elderly people； Systolic blood pressure；Physical activity

帶3蛋白（band 3 protein）是紅細胞膜上含量最為豐富的蛋白質(zhì)，約占膜蛋白含量的25%^[1]，其主要介導Cl^-/HCO₃^- 的跨膜轉運，故又稱(chēng)陰離子交換蛋白1(anion exchanger，AE1)。每個(gè)紅細胞膜上約有10⁶個(gè)拷貝^[1-2] ，它的分子量約為101kD，由911個(gè)氨基酸組成，屬于陰離子交換蛋白家族中的一員。近十幾年來(lái)，國內外對于帶3蛋白的結構與功能的研究日益深入。帶3蛋白有以下生理功能，（1）參與Cl^–/HCO₃^–交換，（2）參與O₂與CO₂的運輸，（3）維持紅細胞的形態(tài)，（4）參與紅細胞內的糖酵解調節。另外，帶3蛋白可以識別和清除衰老紅細胞，對血型的決定也十分重要，最新的研究結果表明帶3蛋白參與細胞增殖和凋亡過(guò)程^[3]。運動(dòng)與氧化應激、紅細胞膜流動(dòng)性以及紅細胞功能有密切相關(guān)，因此，我們推測體力活動(dòng)與紅細胞膜帶3蛋白關(guān)系密切。紅細胞膜帶3蛋白水平與衰老的關(guān)系，國內外研究甚少，周翔等^[4]的研究結果顯示血清和組織中過(guò)氧化脂質(zhì)含量隨著(zhù)年齡的增長(cháng)而增加，脂質(zhì)過(guò)氧化反應對細胞膜和亞細胞器有損傷作用。有研究證明高血壓患者紅細胞變形能力降低^[5]、紅細胞膜流動(dòng)性下降，但高血壓時(shí)是否存在帶3蛋白的變化及其變化機制有待于我們進(jìn)一步研究。為深入了解體力活動(dòng)、年齡、血壓對紅細胞膜帶3蛋白的變化的影響，我們通過(guò)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳對中老年人紅細胞膜蛋白進(jìn)行分析，探討在不同的生理狀態(tài)下帶3蛋白水平的變化。

1 研究對象與方法

1.1 研究對象

采取整群隨機抽樣的方法，在受檢者簽署知情同意書(shū)的情況下，以調查問(wèn)卷的形式收集萊西市夏各莊45歲以上中老年人體檢資料和血樣（由當地醫生抽取）218例，其中，男性80例，占總數36.7%，女性138例，占總數63.3%。年齡45～100歲，平均年齡為65.41歲。

1.2 調查及檢測方法

1.2.1 一般情況 采用問(wèn)卷的形式記錄受檢者的性別、年齡、活動(dòng)水平。年齡每10歲為一組，即40~49，50~59，60~69等。活動(dòng)水平按照中國營(yíng)養學(xué)會(huì )推薦標準分為以下3組：輕體力勞動(dòng)為75%時(shí)間坐或站立，25%的時(shí)間站著(zhù)活動(dòng)，如辦公室工作或售貨員等；中等體力勞動(dòng)為25%時(shí)間坐或站立，75%時(shí)間特殊活動(dòng)，如電工安裝、機動(dòng)車(chē)駕駛或車(chē)床操作等；重體力勞動(dòng)為40%時(shí)間坐或站立，60%的時(shí)間從事特殊職業(yè)活動(dòng)，如體育運動(dòng)、舞蹈或煉鋼等。

1.2.2 體格檢查 測量受檢者的身高、稱(chēng)量體重并計算出BMI；測量血壓。身高、體重的測量方法按照《中國成人超重和肥胖癥預防控制指南（試行）》。根據國際生命科學(xué)學(xué)會(huì )中國辦事處中國肥胖問(wèn)題工作組提出的標準，BMI分為：＜18.5是體重過(guò)低，18.5~23.9為正常體重，24.0~27.9為超重，≥28為肥胖。血壓測定標準：收縮壓（SBP）≥140mmHg和（或）舒張壓（DBP）≥90mmHg為高血壓^[6]。

1.3 實(shí)驗方法

1.3.1 實(shí)驗儀器 電子天平（精確度為萬(wàn)分之一），Sigma冷凍高速離心機（3K30），迷你雙垂直電泳槽（DYCZ-24D），雙穩定時(shí)電泳儀（DYY-6C），微量加樣器，EPSON生物圖像分析系統（perfection 4990 PHOTO）等。

1.3.2 實(shí)驗步驟

1.3.2.1制備凝膠 （1）準備玻璃板，洗凈晾干。將一個(gè)"U"型的硅橡膠帶夾在兩塊長(cháng)短不一的玻璃片中間，玻璃片之間形成一個(gè)2~3mm厚的間隙，制膠時(shí)，將膠灌入其中。按表1配制7%分離膠溶液。

表1  凝膠溶液配制成分表

Table 1  Ingredients of gelatin solution

溶液成分	7%分離膠溶液（ml）	5%濃縮膠溶液（ml）
30%凝膠貯備液	2.3	-
10%凝膠貯備液	-	2.5
3.0mol/L Tris-HCl緩沖液	1.25	-
0.5mol/L Tris-HCl緩沖液	-	1.25
10% SDS	0.1	0.05
1% TEMED	0.8	0.4
蒸餾水	5.45	0.75
10%過(guò)硫酸銨溶液	0.1	0.05
總體積	10.0	5.0

（2）小心將分離膠注入備好的玻璃間隙中，高度距玻璃板上緣約2cm。輕輕在頂層加入幾毫升去離子水，以阻止空氣中的氧對凝膠聚合的抑制作用。室溫下放置30分鐘左右，使其完全聚合凝固，用濾紙吸干凝膠頂層的水。

（3）按表1配制好5%濃縮膠溶液，以連續平穩的流速注入分離膠上端，至玻璃板的頂端，插入梳子。以上整個(gè)過(guò)程應小心避免產(chǎn)生氣泡。

1.3.2.2點(diǎn)樣（1）紅細胞膜制備  采集受試對象新鮮肝素抗凝血，采用低滲破膜法制備紅細胞膜樣本：取新鮮血液1ml，4℃下以3000r/min分離心10分鐘，使紅細胞沉淀后，用吸管小心吸盡血漿及沉淀在紅細胞表層的絨毛狀沉淀層。用PBS緩沖液（4℃）稀釋紅細胞沉淀，離心（3000r/min×10min），棄上清液及沉淀在紅細胞表層的白細胞、血小板等，得下層的紅細胞沉淀。如此重復3次。紅細胞沉淀物中按1:10比例加入預冷的pH7.4，10mmol/L的Tris-HCl緩沖液，搖勻，使之懸浮溶血，置于4℃冰箱中1~2小時(shí)，使之完全溶血。然后于4℃，12000r/min離心10min，重復洗滌離心3~5次得乳白色RBC膜懸液。將最后一次離心所得到的紅細胞懸浮在2~4ml pH 7.4的等滲PBS緩沖液中。用相差顯微鏡檢查膜樣品是否純凈^[7]。膜蛋白含量的測定采用Lowry法^[8]。（2）將洗好的紅細胞膜與2倍樣品緩沖液等體積混勻，一起100℃水浴加熱3min。（3）濃縮膠聚合后，小心拔去梳子，將凝膠放入電泳槽上，在上下槽中加入電泳緩沖液，并用電泳緩沖液沖洗梳孔，注意緩沖液與凝膠兩端不要有氣泡，氣體可用尖端彎曲的滴管排出。（4）將制備好的樣品混合液加入梳孔中。樣品每孔加樣20ml，做好標記和記錄。

1.3.2.3電泳  起始電壓為20V，當染料全部進(jìn)入分離膠后，將電壓調至80V，繼續電泳至溴酚藍到達分離膠底部，距下端約1cm時(shí)關(guān)閉電源，停止電泳。

1.3.2.4染色 卸下電泳膠板，用刮勺小心撬開(kāi)玻璃板，使兩者分離。切去濃縮膠，將分離膠用蒸餾水沖到染色缸內，可任切一小角，對整塊凝膠進(jìn)行方位標記。倒掉蒸餾水，量取溴酚藍遷移距離后，將凝膠浸泡于考馬斯亮藍染色液中4～5個(gè)小時(shí)。

1.3.2.5脫色 取出凝膠，用水漂洗幾次，然后加入脫色液，根據情況更換數次脫色液，脫色至背景透明，條帶顯示清楚。

1.3.2.6掃描、定量分析 利用Quick Scan生物圖像分析系統掃描凝膠（圖1），運用EPSON生物圖像分析系統分析掃描凝膠圖像中紅細胞膜中帶3蛋白相對與紅細胞膜總蛋白的百分含量（%）（圖2）。

圖1  紅細胞膜蛋白SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳圖

Figure 1  SDS - polyacrylamide gel electrophoresis of erythrocyte membrane protein

圖2  紅細胞膜蛋白電泳掃描圖譜

Figure 2  Electrophoresis scanning map of erythrocyte membrane protein

1.4 統計學(xué)分析

數據均采用SPSS 11.0統計軟件進(jìn)行分析。經(jīng)SPSS分析樣本均來(lái)自正態(tài)分布總體且方差齊同。各指標分組之間帶3蛋白水平的關(guān)系均用±s表示。其中性別、血壓、收縮壓、舒張壓各分組間與帶3蛋白水平的關(guān)系均為兩組均數之間差別的比較，采用獨立樣本t檢驗。年齡、BMI與帶3蛋白水平的關(guān)系均為兩組以上均數之間差別的比較，采用單因素方差分析（One-Way ANOVA）。相關(guān)回歸分析均采用Pearson相關(guān)分析和線(xiàn)性回歸。以上所有檢驗將P＜0.05定為差異有統計學(xué)意義。

2 結果

2.1 受檢者年齡、性別及活動(dòng)水平與帶3蛋白水平相關(guān)分析

由表2可見(jiàn)，受檢者基本情況中男、女之間，不同年齡組之間之間的帶3蛋白水平未見(jiàn)明顯差異（P＞0.05）。不同體力活動(dòng)水平帶3蛋白水平不同，中等體力活動(dòng)帶3蛋白水平為24.09%，明顯高于輕體力活動(dòng)水平23.42%(P＜0.05)。

表2 年齡、性別及活動(dòng)水平與帶3蛋白水平的關(guān)系

Table 2  Relationship between age,gender,activity level and band 3 protein levels

注：(1)與輕體力活動(dòng)組比較,P＜0.05

相關(guān)分析顯示性別與帶3蛋白水平呈正相關(guān)，r=0.001,無(wú)統計學(xué)意義（P=0.986）。年齡與帶3蛋白水平均呈負相關(guān)，r=-0.090,無(wú)統計學(xué)意義（P=0.184）活動(dòng)水平與帶3蛋白水平呈正相關(guān)，即隨著(zhù)活動(dòng)水平的增加帶3蛋白水平升高，其相關(guān)系數r=0.149（P=0.030）。

2.2 BMI水平及血壓與帶3蛋白水平相關(guān)分析

由表3可見(jiàn)，BMI值超重者占全部受檢人群16.06%，肥胖者占6.88%。高血壓率為71.10%，收縮壓與舒張壓升高者占總體的61.47%和53.70%。

高血壓患者（收縮壓+舒張壓）帶3蛋白水平為23.42%明顯低于血壓正常者24.25%（P＜0.05）、單純收縮壓升高者帶3蛋白水平為23.33%低于正常者24.20%（P＜0.05）。 受檢者BMI值、高血壓患者（收縮壓+舒張壓）、舒張壓各個(gè)分組之間帶3蛋白水平的差異無(wú)統計學(xué)意義（P＞0.05）。

表3 BMI水平及血壓與帶3蛋白水平的關(guān)系

Table 3 Relationship between BMI, blood pressure and band 3 protein

注：（1）與正常組比較P＜0.05，（2）與正常組比較P＜0.05

相關(guān)分析顯示BMI與帶3蛋白水平呈正相關(guān)，r=0.138,無(wú)統計學(xué)意義（P=0.155）。舒張壓與帶3蛋白水平均呈負相關(guān)，r=-0.108,無(wú)統計學(xué)意義（P=0.116）。收縮壓與帶3蛋白水平呈負相關(guān)，即隨著(zhù)收縮壓的升高帶3蛋白水平降低，相關(guān)系數r=-0.156，有統計學(xué)意義（P=0.023)，其回歸方程Y=-0.0142X+25.712。對收縮壓做相關(guān)性分析如圖3。

Figure 3  Negative correlation between band 3 protein and systolic blood pressure

3 討論

在人紅細胞膜上，帶3蛋白是含量最豐富的蛋白質(zhì)，由于帶3蛋白的重要生理作用以及和多種疾病的發(fā)生相關(guān)，而被公認為細胞膜上最重要的蛋白質(zhì)。本研究運用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳技術(shù)分析中老年體檢者紅細胞帶3蛋白水平，通過(guò)對中老年人體檢的生理指標檢查與帶3蛋白水平關(guān)系的分析，了解到帶3蛋白的水平隨著(zhù)生理狀態(tài)的改變而改變。

本研究結果提示帶3蛋白水平隨著(zhù)活動(dòng)水平的增加而升高，中等體力活動(dòng)帶3蛋白水平為24.09%，明顯高于輕體力活動(dòng)水平23.42%。體力活動(dòng)過(guò)程中機體對氧的需求增加，同時(shí)刺激機體產(chǎn)生大量自由基，運動(dòng)的能量消耗與機體抗氧化能力密切相關(guān)，隨著(zhù)體力活動(dòng)能耗的增加機體抗氧化酶如超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶和過(guò)氧化氫酶等的活性增強，它們足以清除運動(dòng)過(guò)程中產(chǎn)生的自由基，減輕在運動(dòng)過(guò)程中引起的生物膜脂質(zhì)過(guò)氧化損傷，紅細胞膜受損相對減輕，因此，隨著(zhù)體力活動(dòng)的增加紅細胞膜帶3蛋白水平升高。國內外對體力活動(dòng)與紅細胞膜關(guān)系的研究較少，對有氧運動(dòng)的研究較多，有研究證明，有氧運動(dòng)的增加可明顯降低體內脂質(zhì)過(guò)氧化反應，增強機體清除自由基的能力，降低自由基對人體的危害^[3]，此時(shí)紅細胞膜也會(huì )發(fā)生相應變化，紅細胞膜受損相對減輕，帶3蛋白水平升高^[9]，這與我們的研究結果一致。

收縮壓就是當心室收縮射血時(shí)，動(dòng)脈血壓迅速升高，在心室收縮的中期，血壓所達到的最高值。臨床觀(guān)察發(fā)現，隨著(zhù)年齡增長(cháng)而表現的單純收縮壓增高，更易發(fā)生中風(fēng)和冠脈急性事件。在50歲以上的成人，收縮壓超過(guò)140mmHg，是比舒張壓升高更為重要的心血管病危險因素^[10]。國內外對血壓與帶3蛋白水平關(guān)系的研究甚少。本研究結果顯示，單純收縮壓升高者帶3蛋白水平為23.33%低于正常者24.20%。收縮壓和舒張壓與帶3蛋白水平均呈負相關(guān)。原發(fā)性高血壓、各種繼發(fā)性高血壓患者均存在氧化應激增強，體內生成過(guò)量的活性氧簇( reactive oxygen species, ROS)，與此同時(shí)體內抗氧化酶含量降低且活性下降，如SOD、谷胱甘肽氧化酶、過(guò)氧化氫酶，血液中抗氧化維生素如A、C和E水平下降，氧化程度超出抗氧化的能力，體內氧化與抗氧化作用失衡使得機體脂質(zhì)過(guò)氧化反應增強，包括紅細胞膜在內的生物膜受自由基攻擊發(fā)生氧化損傷，紅細胞膜蛋白諸如帶3蛋白、帶4.1蛋白、錨蛋白等成為首要攻擊的靶點(diǎn)，發(fā)生降解^[11]，帶3蛋白水平下降。

年齡、肥胖程度與人體生理狀況有著(zhù)密切的關(guān)系，本研究結果顯示，帶3蛋白水平與年齡、肥胖程度等無(wú)相關(guān)關(guān)系。許多研究表明，帶3蛋白與體內氧化應激水平有著(zhù)密切的關(guān)系，隨著(zhù)體內氧化應激水平的增強，紅細胞膜蛋白的巰基在脂質(zhì)過(guò)氧化作用下被氧化后，蛋白發(fā)生交聯(lián)，易被降解^[12]，帶3蛋白水平下降。隨著(zhù)年齡的增加，機體在新陳代謝過(guò)程中不斷地產(chǎn)生自由基，體內諸如維生素E等抗自由基脂質(zhì)過(guò)氧化作用的物質(zhì)逐漸減少，自由基不能及時(shí)有效地清除，在體內發(fā)生堆積，引起細胞膜、線(xiàn)粒體等氧化損傷^[13]。我們的研究結果顯示年齡與帶3蛋白呈現一定的負相關(guān)趨勢（r=-0.09）但無(wú)統計學(xué)意義，考慮到我們的研究對象為大樣本，雖沒(méi)有顯著(zhù)性但此結果有一定意義。肥胖患者體內氧化應激、脂肪細胞因子水平和激素發(fā)生改變，如血漿超氧化物歧化酶（SOD）、脂聯(lián)素較正常人降低，血清丙二醛（MDA）、瘦素升高^[14]，雌激素水平升高。其中，SOD 水平的降低和MDA水平的升高是體內氧化應激水平升高的標志，但與此同時(shí)有研究證明雌激素具有抗氧化特性，它通過(guò)影響ERK、p38的磷酸化過(guò)程保護脂質(zhì)生物膜免受活性氧的攻擊^[15]。因此，我們研究顯示肥胖與紅細胞膜帶3蛋白無(wú)明顯相關(guān)關(guān)系。

綜上所述，帶3蛋白與人體生理狀態(tài)密切相關(guān)。本研究顯示，帶3蛋白水平與體力活動(dòng)、收縮壓的水平密切相關(guān)，即隨著(zhù)有氧活動(dòng)的增加帶3蛋白水平升高，隨著(zhù)收縮壓的升高帶3蛋白水平下降。當機體生理狀態(tài)發(fā)生改變時(shí)，帶3蛋白的水平和結構也在發(fā)生著(zhù)變化。近年來(lái)，國內外有關(guān)帶3蛋白和疾病關(guān)系的研究日益增多，但是大樣本量的生理狀況檢查并分析其與帶3蛋白關(guān)系的研究尚未見(jiàn)報道。本研究對帶3蛋白水平與人體生理狀態(tài)的關(guān)系進(jìn)行了初步的分析探討，為帶3蛋白檢測技術(shù)發(fā)展成為重要的生理與健康狀況的評價(jià)指標提供了重要的科學(xué)依據。

參考文獻

1  LOW P S.Structure and function of the cytoplasmic domain of band 3:center   of erythrocyte membrane-peripheral protein interactions[J].Biochim Biophys Acta，1986,864(2):145-167.

2  STECK T L，KANT J A.The band 3 protein of the human red cell membrane:a review[J].J Supramol Struct，1978,8(3):311-324.

3  AKEL A，WAGNER C A，KOVACIKOVA J.Enhanced suicidal death of erythrocytes  from gene-targeted mice lacking the Cl-/HCO3- exchanger AE1[J].Am J Physiol Cell Physiol，2007 ,292(5):C1759-1767.

4  姜招峰，周翔.老年大鼠自由基代謝的研究[J].老年學(xué)雜志，1990,10(5):308-309.

5  龔侃，楊美英，任秋萍,等.老年高血壓病患者紅細胞變形能力與LPO、血漿SC5b-9水平的關(guān)系[J].心臟雜志，2002,14(5)：415-416.

6  中國高血壓防治指南修訂委員會(huì ). 2004 年中國高血壓防治指南(實(shí)用本)[J] .  高血壓雜志,2004,12(12):483-486.

7  張龍翔，張庭芳，李令媛.生化試驗方法和技術(shù)[M].北京：高等教育出版社，1997,7:11-14.

8  LOWRY O H，ROSEBROUGH N J, FARR A L， et al. Protein measurement with the Folin phemol reagent[J].J Biol Chem,1951,193(1):265-275.

9  李開(kāi)剛，馮連世，洪平,等.大強度訓練及回復后大鼠紅細胞膜蛋白的變化[J].中國運動(dòng)醫學(xué)雜志，2001,20（3）：244-247.

10 何秉賢.保持心臟健康的途徑[J].心血管病防治知識,2008,5:28.

11 任緒義，張建鵬.紅細胞膜錨蛋白研究進(jìn)展[J].國外醫學(xué)輸血及血液學(xué)分冊，2007,25(3):198-199.

12 潘孝貴，崔小珠，陳文鶴.紅細胞膜帶3蛋白與運動(dòng)研究展望[J].天津體育學(xué)院學(xué)報，2002,17（1）：52-54.

13 范徳義，石華英，肖菊榮.血漿維生素E水平與原發(fā)性高血壓、腦梗死及年齡的關(guān)系[J].中國醫師進(jìn)修雜志，2008,31(2):24-26.

14 沈興平、鄒森彪、吳豪杰,等.肥胖患者氧化應激和脂肪細胞因子變化[J].細胞與分子免疫學(xué)雜志,2008,24(7):721-724.

15 裴新，陸地，周宇冠,等.雌激素對H₂O₂誘導PCl2細胞氧化應激的保護作用研究[J].云南大學(xué)學(xué)報，2010,32（5）：608-612.