陳建國1劉志強2來(lái)偉旗1梅松1付穎1
（1浙江省醫學(xué)科學(xué)院，杭州，310013；2浙江大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，杭州，310029）

摘要：目的探討南瓜發(fā)酵濾液防治小鼠四氧嘧啶糖尿病的作用。方法小鼠分組每天按劑量灌胃一次，然后腹腔注射四氧嘧啶生理鹽水液進(jìn)行預防高血糖試驗。小鼠腹腔注射四氧嘧啶生理鹽水液制成糖尿病模型分組進(jìn)行降血糖試驗。結果：預防高血糖試驗，南瓜發(fā)酵濾液20ml／kg體重劑量組雌、雄小鼠空腹血糖值均明顯低于對照組，分別P＜005或P＜001；并且體重也均明顯高于對照組（P＜001）。降血糖試驗，南瓜發(fā)酵濾液20ml／kg體重劑量組小鼠在實(shí)驗末期血糖值明顯降低，并且也明顯低于對照組（P＜001）；并且其小鼠體重均明顯高于對照組（P＜001），而飲水量明顯低于對照組（P＜0001）。結論南瓜發(fā)酵濾液具有明顯預防四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖值升高、體重減輕的作用；并且具有明顯降低四氧嘧啶糖尿病小鼠空腹血糖值、促進(jìn)其體重恢復、控制其飲水量、緩解煩渴癥狀的作用。
關(guān)鍵詞：南瓜發(fā)酵濾液；小鼠；四氧嘧啶；糖尿病；血糖；預防和治療

Study on Prevention from and Treatment in AlloxanInduced
Diabetic Mice of Pumpkin RemovedSugar Zymotic Fluid.Chen Jianguo1Zhu Ranfeng1Liu zhiqiang2Wang Yin1,
Lai Weiqi1Mei Song1Fu Ying1Hu Xing1
1Zhejiang Academy of Medical Sciences (Hangzhou 310013)
2Zhejiang university (Hangzhou 310029)

Abstract：Objective To investigate the acute toxicity test and the effects of Prevention from and Treatment in AlloxanInduced Diabetic Mice of Pumpkin RemovedSugar Zymotic Fluid (PRSZF) MethodsThe test of Prevention from AlloxanInduced Diabetic Mice: The mice were divided into several groups in random and fed the sample orally daily, and then had injection of alloxan intraperiteneal It was gone on the test of Treatment in that AlloxanInduced Diabetic Mice were divided into 2 groups Result The test of Prevention from AlloxanInduced Diabetic Mice: The blood glucose lever of the mice fed PRSZF 20ml／kg body weight was lower then the control evidently, P＜005 or P＜001.Their body weight was higher then the control obviously , P＜001. The test of Treatment in AlloxanInduced Diabetic Mice: The blood glucose lever and water intake of diabetic mice fed PRSZF 20ml／kg body weight decreased significantly, P＜001. Their body weight was higher then the control obviously , P＜001. ConclusionIt is suggested that PRSZF has effects of Prevention from and Treatment in AlloxanInduced Diabetic Mice.
Keywords: Pumpkin RemovedSugar Zymotic Fluid; Mice; Alloxan; Diabetes; blood glucose; Prevention and Treatment

南瓜為葫蘆科植物南瓜(Cucurbit moschata Duch)的果實(shí)，富含多種氨基酸、多糖、維生素、微量元素和纖維素等［1，2］。《本草綱目》記載，南瓜加靈芝具有“補中、補肝氣、益心氣、益肺氣、益精氣”的作用［3］。民間用南瓜治療糖尿病取得較好的效果［4］。近年來(lái)研究表明，南瓜具有多種食療保健作用，尤其對防治糖尿病的保健作用倍受人們的關(guān)注［5~8］。為了合理開(kāi)發(fā)南瓜資源，尋找一種經(jīng)濟、高效又能為老百姓樂(lè )以接受的防治糖尿病的南瓜保健食品，我們對南瓜發(fā)酵濾液進(jìn)行了本研究。
1 材料與方法
11 南瓜發(fā)酵濾液制備
取老南瓜清洗、去皮和瓢→切片、打碎→加靈芝菌發(fā)酵、去糖→過(guò)濾→取濾液→減壓濃縮30倍而成。南瓜發(fā)酵濾液為淺黃色液體，具特有的清香味。
12 動(dòng)物
選浙江省實(shí)驗動(dòng)物中心繁殖的ICR種健康、成年小鼠若干，為清潔級動(dòng)物（醫學(xué)實(shí)驗動(dòng)物合格證號2001001，醫學(xué)實(shí)驗動(dòng)物設施合格證號2001001）。
13 試劑
四氧嘧啶系Sigma公司生產(chǎn)。血糖試劑盒由寧波慈城生化試劑廠(chǎng)生產(chǎn)。生理鹽水系揚州中寶制藥有限公司生產(chǎn)。
14 動(dòng)物飼養環(huán)境
室溫22~24℃，相對濕度60~70%。
15 實(shí)驗方法
151 預防高血糖試驗［9］取體重20~23g小鼠40只，雌、雄各半。小鼠隨機分成2組，每組20只，雌、雄各半，設一個(gè)對照組（蒸餾水+200mg／kg體重四氧嘧啶）和一個(gè)劑量組（南瓜發(fā)酵濾液20ml／kg體重+200mg／kg體重四氧嘧啶）。南瓜發(fā)酵濾液用蒸餾水溶解、稀釋、配制成所需劑量。實(shí)驗期8天，小鼠分籠飼養，每天按劑量灌胃一次，對照組灌蒸餾水，劑量組灌南瓜發(fā)酵濾液原液，自由進(jìn)食、飲水。在實(shí)驗第4天，小鼠禁食16h，對照組和劑量組均按200mg／kg體重劑量腹腔注射四氧嘧啶生理鹽水液，72h后測空腹血糖。
152 降血糖試驗［9］取體重24~26g雌性小鼠60只，稱(chēng)重，禁食16h，按200mg／kg體重劑量腹腔注射四氧嘧啶生理鹽水液，72h后測空腹血糖，取血糖值在15~30mmol／L 的小鼠30只，按血糖值、體重隨機分成2組，每組15只，設一個(gè)對照組（蒸餾水）和一個(gè)劑量組（南瓜發(fā)酵濾液20ml／kg體重）。小鼠分籠飼養，每天按劑量灌胃一次，對照組灌蒸餾水，劑量組灌南瓜發(fā)酵濾液原液，小鼠自由進(jìn)食、飲水，記錄飲水量，每周稱(chēng)重一次。實(shí)驗期2周，在實(shí)驗末期測空腹血糖值。
16 空腹血糖測定
小鼠禁食16h,尾部采血、及時(shí)離心、取血清按葡萄糖氧化酶法［10］，用試劑盒、島津UV—2100型紫外—可見(jiàn)光分光光度計法測定。
17 統計方法
用SPSS—for windows 100版軟件包進(jìn)行數據統計［11］。
2 結果
21 預防高血糖試驗
211 小鼠一般觀(guān)察 小鼠注射四氧嘧啶24小時(shí)后出現多飲、多食、多尿、體重減輕即“三多一少”癥狀，對照組雌、雄小鼠癥狀十分明顯，并且逐漸加重，有6只小鼠死亡；而劑量組雌、雄小鼠癥狀較輕，并隨實(shí)驗進(jìn)程癥狀逐漸緩解，有3只小鼠死亡。死亡小鼠系死于糖尿病，與灌胃等無(wú)關(guān)。
212 南瓜發(fā)酵濾液對預防四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖值升高的作用結果見(jiàn)表1。劑量組雌、雄小鼠空腹血糖值明顯低于對照組，其差異均有顯著(zhù)性意義，分別P＜005或P＜001。表明南瓜發(fā)酵濾液具有明顯預防四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖值升高的作用。
213南瓜發(fā)酵濾液對預防四氧嘧啶糖尿病小鼠體重的影響結果見(jiàn)表2。
對照組雌、雄小鼠體重在實(shí)驗末期（注射四氧嘧啶后）均明顯減輕，與注射四氧嘧啶前比較，均有極顯著(zhù)性意義（P＜0001）。劑量組雌、雄小鼠體重在實(shí)驗末期（注射四氧嘧啶后）均有增高，雄性小鼠與注射四氧嘧啶前比較有顯著(zhù)性意義（P＜005），并且雌、雄小鼠均明顯高于對照組，其差異均有非常顯著(zhù)性意義（P＜001）。表明南瓜發(fā)酵濾液具有明顯預防四氧嘧啶糖尿病小鼠體重減輕的作用。

22 降血糖試驗
221 小鼠一般觀(guān)察對照組雌、雄小鼠多飲、多食、多尿、體重減輕即“三多一少”癥狀十分明顯，并且逐漸加重；而劑量組小鼠癥狀較輕，并隨實(shí)驗進(jìn)程癥狀逐漸緩解。實(shí)驗期間均未見(jiàn)小鼠死亡。
222 南瓜發(fā)酵濾液對四氧嘧啶糖尿病小鼠空腹血糖值的影響 結果見(jiàn)表3。對照組小鼠空腹血糖值一直維持較高水平，在實(shí)驗末期與造模后比較未見(jiàn)明顯差異。劑量組小鼠在實(shí)驗末期血糖值明顯降低，與造模后比較有非常顯著(zhù)性意義（P＜001），并且也明顯低于對照組，其差異也有非常顯著(zhù)性意義（P＜001）。表明南瓜發(fā)酵濾液具有明顯降低四氧嘧啶糖尿病小鼠空腹血糖值的作用。
223南瓜發(fā)酵濾液對四氧嘧啶糖尿病小鼠體重的影響 結果見(jiàn)表4。各組小鼠體重在造模后均明顯減輕，與造模前比較，均有極顯著(zhù)性意義（P＜0001）。在實(shí)驗末期，各組小鼠體重均有一定的回升，但對照組小鼠仍明顯低于造模前水平，其差異有顯著(zhù)性意義（P＜005）；而劑量組小鼠則明顯高于造模前水平，其差異有顯著(zhù)性意義（P＜005），并且也明顯高于對照組，其差別有非常顯著(zhù)性意義（P＜001）。表明南瓜發(fā)酵濾液具有促進(jìn)四氧嘧啶小鼠體重恢復的作用。

224南瓜脫糖粉對四氧嘧啶糖尿病小鼠飲水量的影響 結果見(jiàn)表5。實(shí)驗期間，對照組小鼠飲水量一直保持在很高的水平。劑量組小鼠飲水量明顯低于對照組，其差別有極顯著(zhù)性意義（P＜0001）。表明南瓜發(fā)酵濾液具有控制四氧嘧啶糖尿病小鼠飲水量、緩解其煩渴癥狀的作用。

3 結論
南瓜發(fā)酵濾液具有明顯預防四氧嘧啶糖尿病小鼠血糖值升高、體重減輕的作用；同時(shí)，具有明顯降低四氧嘧啶糖尿病小鼠空腹血糖值、促進(jìn)其體重恢復、控制其飲水量、緩解煩渴癥狀的作用。
參考文獻
［1］ 謝宇開(kāi)發(fā)南瓜產(chǎn)品的情報研究［j］食品研究與開(kāi)發(fā)，1992，（2）：29~32
［2］ Ternandez ML et al: Pectin isolated from prickly pear (opuntia sp) modifies low density lipoprotein metabolism in cholesterol fed guinea pigs, J Nutr 1990;120 (11): 1283 
［3］ 江蘇新醫學(xué)院編中藥大詞典（下冊）［M］上海；上海科學(xué)技術(shù)出版社，1985，11：1555
［4］ 呂蘭嵩單味中草藥降血糖作用的研究［j］陜西中醫學(xué)院學(xué)報1992，15（3）；35
［5］ Brodaff NB Diabetes Mellitus and Vbesity BaltimoneLondon;Williams and Wilkings 1982,273~279
［6］ 熊學(xué)敏，葉士玲，許春波等南瓜多糖對四氧嘧啶糖尿病大鼠的降糖作用［j］江西中醫學(xué)院學(xué)報1998，10（4）；174~175
［7］ 彭紅，黃小茉，歐陽(yáng)友生等南瓜多糖的提取工藝及其降糖作用的研究［j］食品科學(xué)2002，23（8）；260~262
［8］ 張擁軍，姚惠源南瓜活性多糖的降糖作用及其組成分析［j］無(wú)錫輕工大學(xué)學(xué)報2002，21（2）；173~175
 ［9］ 陳建國，梅松，付穎等四氧嘧啶致小鼠高血糖模型實(shí)驗條件的研究［j］待發(fā)表
［10］ 徐叔云，卞如濂，陳修 藥理實(shí)驗方法學(xué)［M］第二版北京：人民衛生出版社，1994：162，1272~1278
［11］ 盧紋岱，朱一力，沙捷等 SPSS for Windows 從入門(mén)到精通［M］.北京：電子工業(yè)出版社出版，1997：214~315.