陳君石(中國疾病預防控制中心營(yíng)養與食品安全所, 北京 100050)
　　
　　動(dòng)物實(shí)驗是營(yíng)養學(xué)研究中一個(gè)十分重要和不可缺少的部份。然而，這一個(gè)普遍認同的觀(guān)點(diǎn)卻在第17次國際營(yíng)養大會(huì )中H. Spielmann (德國) 教授的主報告 (8月28日上午) 中受到了挑戰。大多數聽(tīng)眾都期望聽(tīng)到的動(dòng)物實(shí)驗中的一些新方法和新趨勢。然而，出乎人們意料的是Spielmann教授給聽(tīng)眾的訊息卻是：在今后的營(yíng)養學(xué)研究中動(dòng)物實(shí)驗將逐漸減少，最終的目標是基本上或完全取消動(dòng)物實(shí)驗。盡管這個(gè)趨勢目前主要出現在歐洲，也不可能在短時(shí)期內在世界上的大部分地區產(chǎn)生明顯的影響；但是，應該看到這一動(dòng)向并非無(wú)稽之談，而且是肯定會(huì )對包括營(yíng)養學(xué)在內的全部生命科學(xué)的研究產(chǎn)生不可忽視的影響。
　　“不鼓勵使用實(shí)驗動(dòng)物”的行動(dòng)在八十年代中期起源于歐洲。歐盟的法規 (EU Directive 86/609/EEC) 明文規定了“不鼓勵使用實(shí)驗動(dòng)物”，其具體要求是減少實(shí)驗動(dòng)物的使用數目和實(shí)驗對動(dòng)物造成的疼痛。同時(shí)，為了尋找動(dòng)物實(shí)驗的替代措施，歐盟設立了位于德國的“歐洲動(dòng)物測試替代方法研究中心”(European Centres for Alternatives to Animal Testing)。隨著(zhù)法規的出臺和相應的機構設置，還提出了一個(gè)具有指南意義的3R原則，即改進(jìn) (refine) 動(dòng)物實(shí)驗的質(zhì)量；減少（reduce）動(dòng)物實(shí)驗的次數和所使的動(dòng)物數目；及以取代（replace）動(dòng)物實(shí)驗作為最終目標。這些動(dòng)向的初步結果是歐洲從1989到1999年的十年間，使用的實(shí)驗動(dòng)物數目從每年230萬(wàn)只減少到150萬(wàn)只。這主要是由于在藥物測試中出現了用體外細胞試驗取代動(dòng)物實(shí)驗的趨勢。同時(shí)，在歐盟內部實(shí)施的“基于OECD動(dòng)物實(shí)驗指南進(jìn)行相互承認”原則，由于避免了不同國家和不同機構之間的重復實(shí)驗而減少了實(shí)驗次數。
　　歐洲在研究動(dòng)物測試的替代方法中嚴格地遵循了驗證（validation）的原則，即任何一種替代方法的提出必須具有針對某一個(gè)實(shí)驗目的的可靠性（reliability）和相關(guān)性（relevance）方面的證據。前者包括方法的可重復性、靈敏度等；而后者主要是指方法的理論依據和實(shí)踐中的相關(guān)性（與動(dòng)物實(shí)驗比較）。在具體驗證過(guò)程中還規定了一套程序。例如，由一個(gè)實(shí)驗室起草了一個(gè)方法后必須由另一個(gè)實(shí)驗室進(jìn)行完善（refinement）；然后，再送給（transfer）另外兩個(gè)實(shí)驗室，檢驗其可行性；在取得歐盟法規當局的批準（regulatory acceptance）以前還必須由另外三個(gè)試驗室對方法的程序（protocol）進(jìn)行驗證。與此同時(shí)，還開(kāi)展了預測模型（prediction model）方面的研究，主要是用于判定體外試驗結果對動(dòng)物和/或人體試驗結果的預測價(jià)值，也是前面提到的相關(guān)性的一部份。
　　那么迄今為止，歐洲在取代動(dòng)物實(shí)驗方面已經(jīng)取得了哪些進(jìn)展呢？從Spielmann教授的報告中可以看出在毒理學(xué)檢測方面已有了不少具體進(jìn)展。這主要表現為在現有的和新的化學(xué)物質(zhì)的毒性檢測中盡量采用體外試驗。傳統的對化學(xué)物質(zhì)毒理學(xué)檢測的程序一般包括：急性毒性（經(jīng)口、經(jīng)皮、吸入）、局部刺激（皮膚、眼）、光敏反應、亞慢性毒性致突變、致畸、慢性毒性和致癌、生殖毒性及特殊毒性（神經(jīng)、免疫等）。在歐洲已提出的對這套程序的改變包括：
　　1. 建議禁止開(kāi)展LD50 試驗（2000年）；如果要開(kāi)展，一個(gè)劑量組只能用一只動(dòng)物。
　　2. 對于檢測局部反應的急性試驗，如眼睛刺激、皮膚刺激、光敏反應等，均已提出了替代的體外試驗方法。
　　3. 對于其他的毒性試驗，目前尚無(wú)替代方法；主要強調改善（refine）動(dòng)物實(shí)驗的質(zhì)量。
　　4. 提出“在較長(cháng)期動(dòng)物實(shí)驗中以狗作為第二個(gè)動(dòng)物種屬（在藥物、食品添加劑、農藥等）不是必要的”。
　　5. 在檢測肉毒桿菌毒素中使用ILISA、PCR、蛋白酶活性等體外試驗方法取代小鼠試驗已通過(guò)統計學(xué)驗證，但尚未取得法規批準。
　　6. 已建立了三套體外試驗系統取代動(dòng)物試驗來(lái)檢測藻類(lèi)和貝殼類(lèi)毒素的毒性。
筆者認為，盡管取代動(dòng)物試驗這一動(dòng)向目前主要局限于歐洲，而且是出于某些非政府組織的壓力；但是，歐洲的上述行動(dòng)是認真的，并非權宜之計，而且預計會(huì )對其他地區的生命科學(xué)研究的各個(gè)領(lǐng)域（包括營(yíng)養學(xué)）逐漸產(chǎn)生重要的影響。